苗药腹水草对大鼠肝纤维化的治疗作用及其分子机制

摘要

目的 探讨苗药腹水草（VLY）水提物调控转化生长因子-β/Smad蛋白（TGF-β/Smad）信号通路对大鼠肝纤维化的影响。方法 取干燥VLY全植株加热回流提取物配置成100 g/L溶液，40只SD大鼠随机均分为对照组、模型组、秋水仙碱（阳性药）组（0.2 mg/kg）及VLY水提物低（400 mg/kg）、高（800 mg/kg）剂量组，后4组大鼠皮下注射CCl₄诱导肝纤维化模型；造模第7周开始，对照组和模型组大鼠灌胃生理盐水，其余各组大鼠灌胃相应药物，1次/d、连续4周，同期观察各组大鼠一般情况并测量体质量；各组大鼠末次给药1周后称体质量，取眼内眦血，检测血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、碱性磷酸酶（ALP）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）等肝功能指标及血清Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（ColⅣ）、层黏连蛋白（LN）、透明质酸（HA）等肝纤维化指标；取血后处死各组大鼠，取肝脏称质量并计算脏器指数；取部分肝左叶组织、采用苏木精-伊红（HE）及苦味酸-酸性品红（VG）染色观察肝脏的组织学特征，采用免疫组织化学染色观察肝组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和TGF-β蛋白的表达，并进行灰度值分析。结果 与对照组比较，模型组大鼠体质量增长缓慢，肝脏质量及肝指数升高（P<0.01）,血清AST、 ALT、ALP、TBIL水平增高（P<0.01）,TP、ALB水平降低（P<0.05）,HA、LN、PCⅢ及ColⅣ水平升高（P<0.05或P<0.01）;与模型组比较，秋水仙碱组及VLY低、高剂量组大鼠肝脏质量及肝指数降低（P<0.01）,血清AST、ALT、TBIL、ALP水平降低（P<0.01）,TP、ALB水平升高（P<0.05）,HA、LN、PCⅢ及ColⅣ水平降低（P<0.05或P<0.01）;HE染色显示，模型组大鼠肝组织严重受损，秋水仙碱组和VLY低、高剂量组大鼠肝脏炎症细胞浸润较模型组减轻；VG染色显示，模型组大鼠肝组织可见较多染成红色的胶原纤维，秋水仙碱组和VLY低、高剂量组大鼠肝脏内胶原纤维较模型组明显减少，VLY低、高剂量组疗效优于秋水仙碱组；免疫组织化学染色显示，模型组大鼠肝组织中α-SMA和TGF-β表达较对照组升高（P<0.01）,秋水仙碱组和VLY低、高剂量组大鼠肝组织中α-SMA、TGF-β表达较模型组明显减少（P<0.01）。结论 VLY水提物可改善肝纤维化大鼠的肝功能，抑制肝纤维化的发生发展，其机制可能与调节TGF-β/Smad信号通路、减少肝纤维化相关因子分泌有关。

关键词

炎症 / 转化生长因子-β / 肝纤维化 / 肝损伤 / 腹水草 / α-平滑肌肌动蛋白