Long non-coding RNA VPS9D1-AS1对乳腺癌细胞恶性行为的影响和机制

摘要

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)VPS9D1-AS1对乳腺癌细胞恶性行为的影响和机制。方法 收集49例接受手术的乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁组织，体外培养人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞系MCF-7、T47D、BT549,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-4695-5p及LncRNA VPS9D1-AS1表达水平；选择MCF-7细胞分别转染si-NC、si-LncRNA VPS9D1-AS1、pcDNA、pcDNA-LncRNA VPS9D1-AS1、miR-NC、miR-4695-5p模拟物、anti-miR-NC+si-LncRNA VPS9D1-AS1、anti-miR-4695-5p+si-LncRNA VPS9D1-AS1,采用RT-qPCR检测MCF-7细胞中LncRNA VPS9D1-AS1、miR-4695-5p表达水平，CCK-8和Transwell实验评估细胞存活率和迁移侵袭数，蛋白质印记法检测IL-6、MMP2、MMP9蛋白水平；双荧光素酶实验证实LncRNA VPS9D1-AS1与miR-4695-5p的靶向关系。结果 LncRNA VPS9D1-AS1在乳腺癌组织和MCF-7、T47D、BT549细胞系中表达上调(P<0.05),miR-4695-5p表达下调(P<0.05),MCF-7细胞中LncRNA VPS9D1-AS1、miR-4695-5p变化最明显，选择MCF-7细胞进行后续实验；转染LncRNA VPS9D1-AS1后，MCF-7细胞存活率、细胞迁移和侵袭数以及IL-6、MMP2、MMP9蛋白水平降低(P<0.05);转染miR-4695-5p模拟物后，miR-4695-5p表达升高(P<0.05),MCF-7细胞存活率、细胞迁移和侵袭数及IL-6、MMP2、MMP9蛋白水平降低(P<0.05);转染pcDNA-LncRNA VPS9D1-AS1后，MCF-7细胞中miR-4695-5p表达下降(P<0.05);共转染anti-miR-4695-5p+si-LncRNA VPS9D1-AS1后，MCF-7细胞存活率、迁移数和侵袭数及IL-6、MMP2、MMP9蛋白水平升高(P<0.05)。结论 干扰LncRNA VPS9D1-AS1通过靶向上调miR-4695-5p抑制促炎因子IL-6表达，进而抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭。

关键词

乳腺肿瘤 / 长链非编码RNA / LncRNA VPS9D1-AS1高表达 / 上皮细胞MCF-10A / 增殖 / 迁移 / 侵袭

基金资助

山东省中医药科技项目(Q-2022044)