1-苯基2-硫脲对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼肿瘤多重耐药相关基因表达的影响

摘要

目的 探讨去色素药物1-苯基2-硫脲(PTU)对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼肿瘤多重耐药相关基因abcb4及其标记基因egfp表达的影响及可能机制。方法 选取受精后24 h(24 hpf)Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼胚胎做药物暴露实验，分为Control、PTU以及PTU+RES 3个组；持续用药96 h,通过荧光显微镜拍照检测各组斑马鱼胃肠道荧光强度；RT-qPCR检测abcb4、egfp及pxr基因mRNA,Western Blot检测abcb4、egfp蛋白(Abcb4、eGFP)的表达，罗丹明B积累实验检测不同组Abcb4功能。结果 与Control组相比，PTU组Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼荧光表达增强(P<0.01),PTU+RES组荧光变化不明显(P>0.05);PTU组abcb4、egfp及pxr基因mRNA表达均增加(P<0.005),PTU+RES组pxr基因mRNA表达增加(P<0.005),abcb4、egfp基因mRNA表达无明显变化(P>0.05);PTU组abcb4、egfp蛋白表达均增加(P<0.005),PTU+RES组无明显变化(P>0.05);PTU组Abcb4功能增强(P<0.01),PTU+RES组无明显变化(P>0.05)。结论 PTU可诱导Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼abcb4和egfp表达增加，核因子pxr可能参与PTU对abcb4和egfp的诱导调节过程，在应用PTU去色素处理的Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼进行药物筛选时需注意PTU对abcb4和egfp表达的影响。

关键词

1-苯基2-硫脲 / 转基因斑马鱼 / 斑马鱼b4型ATP结合盒 / 人B1型ATP结合盒 / 孕烷X受体 / 增强型绿色荧光蛋白