糖通饮对糖尿病肾脏病大鼠足细胞自噬的影响及其机制

摘要

目的 探讨糖通饮(TTY)对糖尿病肾脏病(DKD)模型大鼠足细胞自噬的影响及其机制。方法 36只SPF级雄性大鼠采用高脂高糖饮食(HFD)联合链脲佐菌素(STZ)多次注射建立DKD大鼠模型，并随机分为模型组(Model组，n=6)、930 mg/kg TTY低剂量组(TTY-L组，n=6)、1 860 mg/kg TTY中剂量组(TTY-M组，n=6)及3 720 mg/kg TTY高剂量组(TTY-H组，n=6);Control组和Model组灌胃蒸馏水，另3组分别灌胃相应剂量药物，灌胃连续8周；末次给药后麻醉处死大鼠，检测大鼠空腹血糖(FBG)、尿微量白蛋白(mAlb)、胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量；采用苏木素-伊红(HE)染色、过碘酸-雪夫(PAS)染色、马松(Masson)染色和透射电镜(TEM)观察大鼠肾脏形态学特征、糖原沉积、胶原沉积情况和足细胞及其自噬小体的改变，免疫组织化学法(IHC)检测大鼠肾脏中p62、足细胞结蛋白(Desmin)蛋白表达水平，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾脏中自噬活性指标微管相关蛋白1轻链3(LC3)、自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin-1)蛋白表达水平，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LC3、Beclin-1 mRNA表达水平。结果 与Control组比较，Model组大鼠FBG、mAlb、TC、TG水平升高(P<0.05),大鼠肾脏病理损伤较重，足细胞自噬小体减少，大鼠肾脏中p62、Desmin蛋白表达水平升高(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达下降(P<0.05),LC3及Beclin-1mRNA表达下降(P<0.05);与Model组比较，TTY各剂量组大鼠FBG、TG、TC、mAlb水平有不同程度的降低(P<0.05),肾脏病理损伤减轻，足细胞自噬小体增多，p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及Beclin-1蛋白表达升高(P<0.05),LC3及Beclin-1mRNA表达升高(P<0.05);TTY-M组及TTY-H组Desmin蛋白表达下降(P<0.05)。结论 TTY减轻DKD大鼠足细胞损伤，降低尿蛋白，其作用机制可能与提高足细胞自噬活性有关。

关键词

糖通饮 / 糖尿病肾脏病 / 足细胞损伤 / 自噬 / 结蛋白 / p62