右美托咪定对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导BV-2细胞炎症的影响

摘要

目的 探讨右美托咪定(dexmedetomidine, Dex)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(lipopolysaccharide from P.gingivalis,LPS-PG)诱导BV-2细胞炎症的影响及机制。方法 取对数生长期的BV-2细胞，采用CCK-8实验及Western blot实验于不同Dex浓度(2.5、5.0、10.0μg/L)及不同LPS-PG感染时间(6、12、24、48 h)中挑选出合适的浓度和时间；随后将BV-2细胞随机分为对照组(Con组，只加入DMEM培养基)、Dex组(5.0μg/L Dex)、LPS-PG组(Pg组，1.0 mg/L LPS-PG)及LPS-PG+Dex组(PD组，5.0μg/L Dex预处理1 h后加入1.0 mg/L LPS-PG共同处理)共4组，采用Western blot检测NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)炎性小体、Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)、核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的蛋白表达量变化，采用免疫荧光法检测NF-κB的蛋白表达量变化。结果 根据CCK-8及Western blot检测结果，选取Dex 5.0μg/L、LPS-PG处理12 h用以后续实验；分组后的检测结果显示，与Con组相比，Pg组NF-κB在BV-2细胞核内的表达量增加(P<0.05),核外表达量减少(P<0.05),TLR4、NLRP3、TNF-α的总蛋白表达量增加(P<0.05);Dex组上述指标无明显变化(P>0.05);与Pg组相比，PD组NF-κB在BV-2细胞核内的表达量减少(P<0.05),核外表达量增加(P<0.05),TLR4、NLRP3、TNF-α的总蛋白表达量减少(P<0.05)。结论 Dex可能通过TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路抑制由LPS-PG诱导BV-2细胞产生的神经炎症反应。

关键词

右美托咪定 / 牙龈卟啉单胞菌脂多糖 / Toll样受体4 / 核因子κB / NOD样受体蛋白3 / 神经炎症