hUCMSCs促进VEGF分泌对LPS刺激下牙髓细胞增殖和凋亡及成牙本质细胞分化能力的影响

摘要

目的 探讨人脐带间充质干细胞促进血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)分泌对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激下牙髓细胞增殖、凋亡及成牙本质细胞分化能力的影响。方法 体外培养牙髓细胞，将其分为牙髓细胞组(A组，常规培养)、牙髓细胞+LPS组(B组，牙髓细胞+10 mg/L LPS)、过表达VEGF牙髓细胞+LPS组(C组，牙髓细胞+转染过表达VEGF质粒+10 mg/L LPS)、hUCMSCs+牙髓细胞+LPS组(D组，牙髓细胞和hUCMSCs1∶1混合+10 mg/L LPS)及过表达VEGF牙髓细胞+hUCMSCs+LPS组(E组，转染过表达VEGF质粒的牙髓细胞和hUCMSCs1∶1混合+10 mg/L LPS);采用Real-time PCR法检测VEGF mRNA表达，细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖，末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡，茜素红染色检测成牙本质细胞向分化，免疫印迹法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,COLⅠ)及牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein, DSPP)蛋白表达。结果 与A组比较，B组、C组、D组、E组细胞VEGF mRNA表达、凋亡率均显著升高，细胞增殖率、矿化结节、ALP、COLⅠ及DSPP蛋白表达均显著降低(P<0.05);与B组比较，C组、D组、E组细胞VEGF mRNA表达、增殖率、矿化结节、ALP、COLⅠ及DSPP蛋白表达明显升高，细胞凋亡率明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 人脐带间充质干细胞对LPS刺激下牙髓细胞活性具有显著改善作用，且可显著促进牙髓细胞成牙本质细胞向分化，其机制可能与促VEGF分泌有关。

关键词

人脐带间充质干细胞 / 血管内皮生长因子 / LPS刺激 / 牙髓细胞活性 / 分化能力