奥沙利铂调节LKB1/AMPK/mTOR通路对胃癌细胞增殖、凋亡及免疫逃逸的影响

摘要

目的 探讨奥沙利铂（oxaliplatin, OXA）调节肝激酶B1（liver kinase B1,LKB1）/单磷酸腺苷激活的蛋白激酶[adenosine 5′-monophosphate （AMP）-activated protein kinase, AMPK]/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin, mTOR）通路对胃癌（gastric cancer, GC）细胞增殖、凋亡及免疫逃逸的影响。方法 体外培养人GC细胞（SGC-7901）,分为Control组（正常培养）、L-OXA组（6.2 mg/L OXA）、M-OXA组（12.5 mg/L OXA）、H-OXA组（25 mg/L OXA）及Radicicol组（25 mg/L OXA+5μmol/L LKB1抑制剂Radicicol）;培养48 h后，采用CCK8和平板克隆实验检测细胞的增殖能力，划痕实验测定细胞的迁移能力，Transwell实验测定细胞的侵袭能力，流式细胞仪测定细胞的凋亡，Western blot测定细胞中PCNA、Bax、Bcl-2、LKB1/AMPK/mTOR信号通路相关蛋白（p-LKB1/LKB1、p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR）表达；将GC细胞SGC-7901与CD8⁺T细胞共培养，并按不同的处理分为共培养组、OXA组、抑制剂组、对照效应细胞（单独培养CD8+T细胞）组及对照靶细胞（单独培养SGC-7901）组，采用CCK8实验计算活化CD8⁺T细胞的杀伤率。结果 与Control组比较，L-OXA组、M-OXA组、H-OXA组细胞的存活率、克隆数、PCNA、迁移率、侵袭数、Bcl-2、p-mTOR/mTOR表达降低，但细胞凋亡率、Bax、p-LKB1/LKB1、p-AMPK/AMPK表达升高（P<0.05）;与H-OXA组比较，Radicicol组细胞的存活率、克隆数、PCNA、迁移率、侵袭数、Bcl-2、p-mTOR/mTOR表达升高，但细胞凋亡率、Bax、p-LKB1/LKB1、p-AMPK/AMPK表达降低（P<0.05）;免疫逃逸实验中，OXA组较共培养组的活化CD8⁺T细胞的杀伤率升高（P<0.05）;抑制剂组较OXA组的活化CD8⁺T细胞的杀伤率降低（P<0.05）。结论 OXA可能通过调节LKB1/AMPK/mTOR信号通路，促进GC细胞SGC-7901凋亡的发生，抑制其增殖、迁移、侵袭及免疫逃逸。

关键词

奥沙利铂 / LKB1/AMPK/mTOR通路 / 胃肿瘤 / 细胞增殖 / 免疫逃逸