体外转录OVA mRNA抑制小鼠结肠癌和三阴型乳腺癌移植瘤的研究

摘要

目的 比较瘤内注射自制体外转录鸡卵清蛋白(ovalbumin, OVA) mRNA和市售OVA mRNA对小鼠CT26结肠癌和4T1三阴型乳腺癌移植瘤细胞的免疫治疗效果。方法 将合成的OVA基因片段插入真核表达载体pcDNA3.1(+)构建重组表达质粒pcDNA3.1-OVA,经酶切和测序鉴定正确后，以重组质粒为模板、PCR扩增包含T7启动子和OVA基因片段的PCR产物作为体外转录模板，通过体外转录、加poly(A)尾、纯化后获得修饰的OVA mRNA;分别在小鼠右后侧皮下接种结肠癌CT26细胞和三阴型乳腺癌4T1细胞、在小鼠乳腺脂肪垫注射三阴型乳腺癌4T1细胞，第6天和第13天时进行两次瘤内注射自制体外转录OVA mRNA或市售OVA mRNA,观察各组小鼠肿瘤生长抑制情况。结果 酶切鉴定和测序分析结果证实重组质粒pcDNA3.1-OVA构建成功；体外转录OVA mRNA和市售OVA mRNA都能抑制小鼠结肠癌和乳腺癌皮下肿瘤生长(P<0.05),治疗效果比较，差异无统计学意义(P>0.05),但不能抑制乳腺原位移植瘤生长(P>0.05)。结论 瘤内注射自制体外转录OVA mRNA能抑制小鼠结肠癌和三阴型乳腺癌皮下肿瘤生长，不能抑制三阴型乳腺癌原位瘤生长，治疗效果与市售OVA mRNA相当。

关键词

结肠肿瘤 / 三阴型乳腺癌移植瘤 / 瘤内治疗 / 体外转录mRNA / 卵清蛋白