基于NOD1/RIP2/NF-κB信号通路探讨丹参酮ⅡA对复发性流产小鼠子宫母胎界面免疫状态的影响

摘要

目的 探讨丹参酮ⅡA调控含核苷酸结合寡聚化域蛋白1(nucleotide binding oligomerization domain containing protein 1,NOD1)/受体相互作用蛋白2(receptor-interacting protein 2,RIP2)/核因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)通路对复发性流产(recurrent spontaneous abortion, RSA)小鼠子宫母胎界面免疫状态的影响。方法 雌性CBA/J小鼠随机分为对照组、RSA组、丹参酮ⅡA低浓度组、丹参酮ⅡA高浓度组、地屈孕酮组及丹参酮ⅡA高浓度+NOD1激活剂组(TriDAP),每组12只；于每日清晨对各组小鼠进行给药处理，处理14 d后，将动情期的对照组CBA/J小鼠与BALB/c小鼠按2∶1合笼构建正常妊娠，其它组CBA/J小鼠与DBA/2小鼠按2∶1合笼构建RSA模型，次日以小鼠阴道涂片出现大量精子且阴道口大开记为妊娠第1天，各组小鼠继续给药处理直至妊娠第10天；末次处理24 h后，检测小鼠胚胎丢失率，HE染色检测子宫蜕膜组织病理；取母胎界面组织，流式细胞术检测辅助性T细胞(helper T cell, Th)1、Th2占比及Th1/Th2比例，ELISA检测γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、IL-4水平，Western blot检测NOD1、RIP2、NF-κB p65蛋白表达水平。结果 与对照组比较，RSA组小鼠子宫蜕膜组织显示排列紊乱的单个细胞数量减少，部分细胞核凝聚，细胞质染色不均匀，细胞间质水肿明显，血管数减少，胚胎丢失率、母胎界面组织中Th1占比、Th1/Th2比例、IFN-γ、TNF-α水平及NOD1、RIP2、NF-κB p65蛋白升高，母胎界面组织中Th2占比、IL-10、IL-4水平降低(P<0.05);与RSA组比较，丹参酮ⅡA低浓度组、丹参酮ⅡA高浓度组、地屈孕酮组小鼠子宫蜕膜组织病理损伤有所改善，胚胎丢失率、母胎界面组织中Th1占比、Th1/Th2比例、IFN-γ、TNF-α水平及NOD1、RIP2、NF-κB p65蛋白降低，母胎界面组织中Th2占比、IL-10、IL-4水平升高(P<0.05);TriDAP逆转了高浓度丹参酮ⅡA对RSA小鼠母胎界面Th1/Th2平衡的促进作用。结论 丹参酮ⅡA可能通过抑制NOD1/RIP2/NF-κB通路促进RSA小鼠母胎界面Th1/Th2平衡，改善免疫状态。

关键词

丹参酮ⅡA / 复发性流产 / 母胎界面 / 免疫 / Th1/Th2