WNK1促进β-catenin核转位在DKD小鼠肾纤维化中的作用研究

摘要

目的 探讨赖氨酸缺陷蛋白激酶-1(with no lysine kinase 1,WNK1)是否可以通过促进β-连环蛋白(β-catenin)核转移，进而促使糖尿病肾脏疾病(diabetes kidney disease, DKD)小鼠肾纤维化的发生。方法 将糖尿病(diabetes mellitus, DM)小鼠(db/db)随机将分为DM组(db/db组)、DM空载组(db/db+si-NC组)和DM WNK1敲低腺相关病毒组(db/db+si-WNK1组),设同时点正常对照组(db/m组),每组6只；24周时收集动物尿液、血液以及肾组织标本，试剂盒法检测各组小鼠血糖、血肌酐、24 h尿蛋白，HE及Masson染色观察各组小鼠肾脏病理改变，qRT-PCR及Western blot方法检测WNK1、β-catenin以及细胞外基质成分[纤维连接蛋白(fibronectin, FN)和Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)]的表达变化；用试剂盒分离胞核蛋白后，检测各组动物肾组织中β-catenin表达变化。结果 与db/m组相比，db/db组小鼠的血糖、血肌酐、24 h尿蛋白明显增加(P<0.05);HE及Masson染色结果显示，db/db组小鼠肾小球基质及系膜细胞出现轻至中度增生，肾小球和间质可见明显胶原蓝染(P<0.05);db/db组小鼠肾组织WNK1、FN、CollagenⅢ蛋白和mRNA表达增加(P<0.05),β-catenin总蛋白和在胞核中表达增加(P<0.05);敲低WNK1表达后，与对照组及db/db+si-NC相比，db/db+si-WNK1组小鼠的血糖差异无统计学意义(P>0.05),而血肌酐、24 h尿蛋白下降(P<0.05),肾脏病理损伤有所减轻；肾组织WNK1、FN、CollagenⅢ蛋白和mRNA表达减少(P<0.05),β-catenin总蛋白在胞核中的表达也减少(P<0.05)。结论 WNK1可以通过促进β-catenin核移位，增加细胞外基质沉积，促使DKD小鼠肾纤维化发生。

关键词

赖氨酸缺陷蛋白激酶-1 / β-连环蛋白 / 核转位 / 肾纤维化 / db/db小鼠