IL-18在红斑狼疮模型小鼠中的促炎作用及其在Wnt通路中的作用机制

摘要

目的 评估白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)在红斑狼疮模型(MRL/lpr)小鼠中的促炎及肾脏损害作用，探讨其与Wnt/β-catenin信号通路中糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白的关系。方法 选择5～6周龄雌性MRL/lpr小鼠分为模型组(n=8)及IL-18组(n=8),相同周龄、性别的C57BL/6小鼠为对照组(n=8);自8周龄起，对照组和模型组小鼠腹腔注射灭菌注射用水(0.1 mL/只),IL-18组腹腔注射IL-18注射液(500 ng/只),每天1次，持续8周；每两周检查检测1次各组小鼠尿蛋白水平；给药结束后麻醉处死小鼠，摘取小鼠脾脏、肾脏，计算脏器系数；ELISA法检测小鼠血清肌酐(serum creatinine, Scr)、抗双链DNA抗体(anti-double-stranded DNA antibody, Anti-dsDNA)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、IL-1β、IL-6及IL-10水平；HE染色观察肾脏组织结构改变及炎症浸润情况，IHC和Western blot检测肾组织中β-catenin、GSK-3β及pGSK-3β蛋白的表达情况。结果 与对照组相比，模型组及IL-18组小鼠24 h尿蛋白水平在12～14周龄时开始升高，16周龄时IL-18组升高明显；与对照组比较，IL-18组肾脏、脾脏系数增大(P<0.05);肾脏HE染色结果显示，模型组及IL-18小鼠肾脏光镜下可见肾小球系膜细胞增生，炎症细胞浸润，肾小管变形坏死，以IL-18组小鼠病变最为显著；与对照组比较，IL-18组小鼠肾组织β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达增高(P<0.05);但GSK-3β蛋白在模型组和IL-18组的差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较，IL-18组Scr、Anti-dsDNA、IFN-γ水平升高(P<0.05);与对照组及模型组比较，IL-18组IL-1β、IL-6水平升高(P<0.05),IL-10水平降低(P<0.05)。结论 IL-18在MRL/lpr小鼠中发挥促炎作用，其机制可能是通过抑制GSK-3β蛋白过度激活，阻止β-catenin蛋白降解而参与肾脏损害。

关键词

白细胞介素-18 / Wnt / GSK-3β / β-catenin / 系统性红斑狼疮 / 狼疮性肾炎