Nurr1通过TLR4/NF-κB信号通路对衰老小鼠中脑黑质区慢性炎症的调控

摘要

目的 探讨核蛋白相关受体1(nuclear receptor related 1,Nurr1)通过调节Toll样受体4/核因子-κB(toll-like receptor 4,TLR4/nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路调控衰老相关慢性炎症及多巴胺能神经元的相关机制。方法 将昆明小鼠分为幼年组(Y组，1月龄)、成年组(A组，3月龄)、衰老模型组(A-M组，3月龄)以及阿莫地喹盐酸盐(camodiaquine, AQ)处理衰老模型组(AQ组，3月龄);A-M组及AQ组小鼠均为模型小鼠(采用颈背部皮下注射D-半乳糖构建衰老模型),AQ组造模第3周开始注射AQ;观察各组小鼠一般体征和体质量变化；采用HE染色观测中脑黑质区神经元形态学特征；ELISA检测小鼠中脑肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-6的表达；免疫荧光双染检测小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)与p-TLR4、TH与p-NF-κB p65的共表达；Western blot检测中脑黑质区Nurr1、TH、p-NF-κB p65、p-TLR4蛋白的表达。结果 模型组小鼠精神萎靡，嗜睡且喜蜷缩，体质量增长缓慢，提示衰老模型构建成功；与Y组和A组比较，A-M组黑质区神经元数量减少(P<0.01),Nurr1、TH阳性细胞数和蛋白表达减少(P<0.05),中脑IL-1β、IL-6及TNF-α增高(P<0.05),p-NF-κB p65及TH和p-TLR4的共定位阳性细胞数以及p-NF-κB p65、p-TLR4的蛋白表达增加(P<0.05);与A-M组比较，AQ组小鼠黑质区神经元数量增加(P<0.05),Nurr1、TH阳性细胞数和蛋白表达增加(P<0.05),中脑IL-1β、IL-6和TNF-α降低(P<0.05),TH和p-NF-κB p65及TH和p-TLR4的共定位阳性细胞数以及p-NF-κB p65、p-TLR4蛋白表达减少(P<0.05)。结论 Nurr1通过抑制TLR4/NF-κB通路，减少衰老相关慢性炎症产生，增加多巴胺神经元的数量。

关键词

核蛋白相关受体1 / Toll样受体4/核因子-κB信号通路 / 衰老 / 慢性炎症 / 多巴胺能神经元 / 黑质区