姜黄素通过调控miR-100-3p/SOAT1通路对结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的 探讨姜黄素（curcumin, Cur）通过调节miR-100-3p/SOAT1通路对结直肠癌（colorectal cancer, CRC）细胞增殖和凋亡的影响。方法 将结直肠癌SW480细胞分为对照组（control组）、Cur组、Cur+inhibitor NC组、Cur+miR-100-3p inhibitor组、Cur+miR-NC组及Cur+miR-100-3p mimic组；采用qRT-PCR检测miR-100-3p、SOAT1 mRNA表达水平，采用CCK-8检测24和48 h时细胞增殖能力(酶标仪测定OD₄₅₀值),Transwell实验检测细胞迁移和侵袭，流式细胞仪检测细胞凋亡，Matrigel胶三维培养观察血管拟态（vascular mimicry, VM）结构数量，Western blot检测E-钙黏蛋白（epithelial cadherin, E-cadherin）、N-钙黏蛋白（neural cadherin, N-cadherin）、波形蛋白中间丝蛋白（vimentin intermediate filament protein, vimentin）、半胱氨酸蛋白酶3（cysteine proteinase-3,cleaved caspase-3）、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）、固醇O-酰基转移酶1（sterol o-acyltransferase 1,SOAT1）蛋白表达水平及基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP-9）,荧光素酶活性分析miR-100-3p和SOAT1的靶向关系。结果 与Control组比较，Cur组SW480细胞miR-100-3p表达水平升高，SOAT1 mRNA表达水平降低，细胞OD₄₅₀值（24、48 h）降低，迁移和侵袭个数降低，凋亡率升高，VM结构数量降低，E-cadherin及cleaved caspase-3蛋白表达水平升高，N-cadherin、vimentin、PCNA、MMP-9及SOAT1蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义（P<0.05）;下调miR-100-3p表达可减弱Cur对结直肠癌SW480细胞恶性生物学行为的抑制作用（P<0.05）,上调miR-100-3p表达可进一步增强Cur对结直肠癌SW480细胞恶性生物学行为的抑制作用（P<0.05）。结论 Cur可调控miR-100-3p/SOAT1通路来抑制SW480细胞恶性生物学行为。

关键词

姜黄素 / miR-100-3p/SOAT1通路 / 结直肠肿瘤 / 细胞增殖 / 细胞凋亡