七氟醚对神经病理性疼痛大鼠痛觉的影响及其机制

摘要

目的 探讨七氟醚麻醉对神经病理性疼痛大鼠痛觉的作用及其机制。方法 140只SD大鼠随机均分为健康对照组、模型组、低剂量七氟醚组、中剂量七氟醚组、高剂量七氟醚组、SIRT1抑制剂组及SIRT1激动剂组，除健康对照组正常饲养外，其余6组大鼠制备脊髓骨折后神经病理性疼痛动物模型；造模成功后，低、中、高剂量七氟醚组(1%、2%、3%七氟醚)大鼠持续吸入30 min, SIRT1抑制剂组大鼠鼠尾注射SIRT1抑制剂溶液5 mL,SIRT1激动剂组大鼠灌胃SIRT1激动剂溶液5 mL,健康对照组及模型组吸入纯氧30 min,连续1周；末次给药24 h后，取各组大鼠10只分别测试机械疼痛敏感性及热撤退潜伏期；完成上述行为学检测后麻醉处死各组大鼠，取脊髓组织，采用原位末端标记技术(terminal-deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling, TUNEL)法检测脊髓细胞凋亡情况，采用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应反转录(polymerase chain reaction reverse transcription, PCR),检测核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)、细胞沉默信息调节因子1(silencing information regulatory factor 1,SIRT1)蛋白和SIRT1、NF-kB信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid, mRNA)的表达，采用酶联免疫吸附法测定炎性因子[白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]及氧化应激指标[超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)]水平。结果 治疗前，与健康对照组比较，模型组大鼠机械撤退阈值、热撤退潜伏期、SIRT1蛋白和mRNA、及SOD表达下降(P<0.05),TUNEL阳性细胞、NF-κB蛋白和mRNA、IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA表达升高(P<0.05);治疗1周后，低剂量七氟醚组、中剂量七氟醚组、高剂量七氟醚组及SIRT1激动剂组大鼠机械撤退阈值、热撤退潜伏期、SIRT1蛋白和mRNA、SOD表达较模型组升高(P<0.05),TUNEL阳性细胞、NF-κB蛋白和mRNA、IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA表达较模型组下降(P<0.05);治疗1周后，高剂量七氟醚组及SIRT1激动剂组大鼠机械撤退阈值、热撤退潜伏期、SIRT1蛋白和mRNA、SOD表达较中剂量七氟醚组升高(P<0.05),TUNEL阳性细胞、NF-κB蛋白和mRNA、IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA表达较中剂量七氟醚组下降(P<0.05)。结论 七氟醚对神经病理性疼痛大鼠有镇痛作用，其机制可能与SIRT1/NF-κB信号通路有关。

关键词

七氟醚 / 神经病理性疼痛 / 沉默信息调节因子1/核转录因子-κB / 镇痛 / 炎症因子