LncRNA KCNQ1OT1靶向调控miR-7-5p对肾母细胞瘤细胞迁移和侵袭的影响

摘要

目的 探讨长链非编码RNA（long non coding RNA,LncRNA）钾电压门控通道亚家族Q成员1反链/反义转录物1（potassium voltage-gated channel subfamily Q member 1 reverse/antisense transcript 1,KCNQ1OT1）靶向调控微小RNA-7-5p（microRNA-7-5p, miR-7-5p）对肾母细胞瘤（wilms tumor, WT）细胞迁移和侵袭的影响。方法 收集26例WT患儿术中切除的癌旁组织及WT组织，采用qRT-PCR法检测WT及癌旁组织中LncRNA KCNQ1OT1、miR-7-5p的表达；将WiT49细胞随机分为Control组（正常培养）、sh-NC（转染sh-NC）组、sh-KCNQ1OT1（转染sh-KCNQ1OT1）组、sh-KCNQ1OT1+anti-NC（转染sh-KCNQ1OT1+anti-NC）组及sh-KCNQ1OT1+anti-miR-7-5p（转染sh-KCNQ1OT1+anti-miR-7-5p）组；24 h后采用qRT-PCR测定各组WiT49细胞中LncRNA KCNQ1OT1、miR-7-5p表达，CCK8和平板克隆法检测WiT49细胞增殖能力，划痕实验检测WiT49细胞迁移能力，Transwell实验检测WiT49细胞侵袭能力，Western blot检测WiT49细胞中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP）-2、MMP-9蛋白的表达。结果 WT组织LncRNA KCNQ1OT1 mRNA表达高于癌旁组织，miR-7-5p表达低于癌旁组织（P<0.05）;与sh-NC组和Control组比较，sh-KCNQ1OT1组细胞增值的A₄₅₀值、克隆数、划痕愈合率、侵袭数、LncRNA KCNQ1OT1、MMP-2及MMP-9表达下降，miR-7-5p表达增高（P<0.05）;与sh-KCNQ1OT1组和sh-KCNQ1OT1+anti-NC组比较，sh-KCNQ1OT1+anti-miR-7-5p组细胞增殖的A₄₅₀值、克隆数、划痕愈合率、侵袭数及MMP-2、MMP-9表达升高，miR-7-5p表达下降（P<0.05）。结论 敲低LncRNA KCNQ1OT1通过靶向调控miR-7-5p抑制WT细胞的迁移和侵袭。

关键词

长链非编码RNA / 钾电压门控通道亚家族Q成员1反链/反义转录物1 / 微小RNA-7-5p / 肾母细胞瘤 / 迁移