黑腹果蝇slmb新突变体mf917的鉴定

摘要

目的 鉴定果蝇品系mf917的突变基因slmb,并探究其造成果蝇翅及复眼发育缺陷的原因。方法 突变品系mf917进行直接镶嵌克隆(direct mosaic clone)分析和镶嵌克隆(mosaic clone)分析，观察成虫翅及复眼的表型并解剖翅成虫盘；使用免疫荧光(immunofluorescent, IF)染色方法检测Notch、Wnt、Hippo和Hedgehog信号通路的靶基因或报告基因在mf917克隆中的表达情况，判断mf917与这些信号通路的相关性；使用反向PCR鉴定mf917中Minos转座子的插入位点及所影响的基因；利用转座子精确剪切方法检测插入mf917转座子跳除后表型是否恢复；使用mf917与已报道的slmb突变进行互补实验，进一步验证mf917与slmb的相关性。结果 突变品系mf917存在翅发育缺陷以及复眼增生等表型，三龄幼虫翅成虫盘野生型区域出现明显增生；在mf917克隆中，Notch信号靶基因Cut和Wingless(Wg)表达无明显变化，Wnt信号报告基因Dll-lacZ和fz3-lacZ表达升高，Hippo信号报告基因CycE-lacZ和ex697-lacZ表达下降、bantam sensor-GFP表达升高，Hedgehog信号报告基因ptc-lacZ和Ci蛋白在翅成虫盘前部腔室克隆中表达升高；mf917突变影响的基因是slmb。结论 mf917通过调控Wnt、Hippo和Hedgehog信号通路，从而影响果蝇翅和复眼的发育，mf917鉴定为一个slmb新突变体。

关键词

黑腹果蝇 / slmb基因 / mf917 / Wnt信号通路 / Hippo信号通路 / Hedgehog信号通路