α-硫辛酸对氧化损伤模型中α-突触核蛋白影响的研究

摘要

目的 研究α-硫辛酸（alpha-lipoic acid, ALA）对氧化损伤模型中α-突触核蛋白（α-synuclein, α-syn）表达的影响。方法 体外采用过氧化氢（hydrogen peroxide, H₂O₂）诱导PC12细胞建立氧化损伤模型，将其分为对照组、模型组（H₂O₂处理）、ALA组（ALA+H₂O₂）;体内将α-syn过表达的秀丽隐杆线虫（NL5901）分为对照组、ALA组；CCK-8法筛选H₂O₂最佳造模浓度以及ALA最佳干预浓度；线虫寿命实验检测ALA毒性作用，荧光探针染色法检测细胞内活性氧（reactive oxygen species, ROS）水平，流式细胞术检测体外细胞凋亡，ELISA检测线虫体内ROS含量，Western blot法检测体内外α-syn及沉默信息调控因子1 （silence information regulator 1,SIRT1）的表达水平。结果 细胞模型中，与对照组相比，细胞内ROS含量和细胞凋亡率显著增高（P<0.000 1,P<0.001）,α-syn表达显著上升（P<0.001）,SIRT1表达显著降低（P<0.01）;与模型组相比，ALA干预后细胞内ROS含量和细胞凋亡率降低（P<0.01,P<0.05）,α-syn表达降低（P<0.05）,SIRT1表达显著升高（P<0.01）;线虫模型中，与过表达α-syn组相比，50、100、200μmol/L ALA组对NL5901线虫毒性比较，差异无统计学意义（P>0.05）;50、100μmol/L ALA组可降低NL5901线虫内ROS含量、α-syn表达（P<0.01,P<0.05）,可上调SIRT1表达水平（P<0.05）。结论 ALA通过上调SIRT1表达、降低氧化应激水平，从而抑制α-syn过表达。

关键词

α-硫辛酸 / 过氧化氢 / 氧化损伤 / 氧化应激 / 沉默信息调控因子1 / α-突触核蛋白