耳念珠菌CBS12766的体外毒力表型及其对巨噬细胞和大蜡螟毒力作用的研究

摘要

目的 耳念珠菌CBS12766菌株体外毒力表型的鉴定，及该菌株对骨髓源性巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages, BMDM)和大蜡螟毒力作用的评估。方法 取耳念珠菌CBS12766进行复苏培养，使用白念珠菌SC5314菌株作阳性对照，使用结晶紫法检测生物膜的形成，镜下检测其细胞分布状态，配制胞外产物酶所需培养基检测其胞外产物酶的分泌能力；使用CBS12766菌株感染BMDM,检测耳念珠菌在BMDM中的存活率，并测定BMDM的促炎性细胞因子表达水平；使用CBS12766菌株感染大蜡螟幼虫，绘制生存曲线(72 h),组织仪充分研磨受感染的大蜡螟涂布于平板上培养并计数菌落数，计算其载菌量。结果 耳念珠菌CBS12766菌株能够形成生物膜，呈聚集态分布，且具有磷脂酶、蛋白水解酶和溶血素活性，感染BMDM后该菌株能大量存活；与白念珠菌SC5314菌株相比，耳念珠菌CBS12766感染BMDM后白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)表达量较低(P<0.001);耳念珠菌CBS12766感染大蜡螟模型中，幼虫12 h开始死亡，48 h全部死亡，且该菌株在大蜡螟中大量存活。结论 耳念珠菌CBS12766菌株具有差异化体外毒力表型，该菌株能感染BMDM和大蜡螟，并具有一定毒力作用。

关键词

耳念珠菌CBS12766 / 毒力表型 / 巨噬细胞 / 模型构建 / 大蜡螟幼虫