辛伐他汀对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响及机制

摘要

目的 探讨辛伐他汀对胃癌（gastric cancer, GC）细胞HGC-27和MKN-74l的增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响及其分子机制。方法 取对数生长期人GC细胞系HGC-27和MKN-74各自设置对照（Control）组[等量二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide, DMSO）]和辛伐他汀组（10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L及100μmol/L）,采用细胞毒性增殖实验（cell counting kit-8, CCK-8）检测各组细胞存活率并计算半数抑制浓度(half-maximal inhibitory concentration, IC₅₀),确定后续辛伐他汀组浓度；取上述2种细胞分别设置对照组及40μmol/L和80μmol/L辛伐他汀组，采用克隆形成实验检测各组细胞集落数，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，流式细胞仪检测细胞凋亡率，采用网络药理学初步分析辛伐他汀的作用机制，Western blots实验检测各组细胞上皮间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）间质细胞标志物波形蛋白（Vimentin）、磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide 3 kinase, PI3K）、蛋白激酶B（protein kinase B, Akt）、磷酸化Akt（phosphorylated Akt, p-Akt）、B淋巴细胞瘤蛋白-2（B-cell lymphoma protein-2, Bcl-2）及Bcl-2-相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein, Bax）蛋白的表达。结果 与Control组比较，40μmol/L和80μmol/L辛伐他汀组HCG-27、MKN-74细胞的增殖和集落形成能力降低（P<0.05）,细胞迁移和侵袭细胞数量减少，细胞凋亡比例增加，抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调，Bax蛋白表达上调（P<0.05）;对辛伐他汀的抗GC作用进行网络药理学分析，确定了辛伐他汀抗GC作用的潜在作用靶点有103个，并以此构建蛋白互做网络（protein-protein interaction, PPI）,显示PI3K/Akt信号通路上的高度富集；并据此验证分析，与Control组相比，40μmol/L和80μmol/L辛伐他汀组HCG-27、MKN-74细胞间质细胞标志物Vimentin、PI3K、Akt及p-Akt蛋白表达下调（P<0.05）。结论 辛伐他汀可抑制GC细胞HGC-27、MKN-74的增殖、迁移及侵袭，诱导细胞凋亡，其机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。

关键词

胃肿瘤 / 细胞增殖 / 细胞迁移分析 / 胃癌细胞 / 辛伐他汀