痤疮丙酸杆菌噬菌体的分离及抗菌应用研究

摘要

目的 探讨痤疮丙酸杆菌(Cutibacterium acnes,C.acnes)噬菌体P919的生物学特性，并初步评估其抗菌潜力与生物安全性。方法 采用双层平板法分离C.acnes噬菌体P919,通过测定感染复数(multiple of infection, MOI)、绘制一步生长曲线、检测不同温度(37～60℃)和pH(3～10)条件下的活性以系统表征其生物学特性；利用全基因组测序并评估毒力及耐药基因携带情况；通过透射电镜观察其形态特征；采用结晶紫染色法检测其对生物膜的清除能力；使用细胞增殖毒性-8(cell counting kit-8, CCK-8)检测噬菌体对HaCaT的细胞毒性；并制备3%CMC-Na噬菌体凝胶制剂，使用双层平板法评价其活性稳定性。结果 成功分离获得1株长尾噬菌体科(Siphoviridae)裂解性噬菌体P919:其基因组未携带毒力及耐药基因且编码保守裂解酶；P919感染宿主菌后裂解量为1 071 PFU/cell,于温度为37～60℃、pH为3～10环境中均能保持稳定活性；P919可显著抑制细菌生长并能清除成熟生物膜；CCK-8实验显示其对HaCaT细胞无毒性作用且3%CMC-Na制备的凝胶制剂可在8 d内保持稳定活性。结论 噬菌体P919具备良好的裂解活性、广泛的环境适应性及较高的生物安全性，显示出潜在的抗菌应用价值。

关键词

痤疮丙酸杆菌 / 噬菌体疗法 / 生物膜 / 噬菌体 / 痤疮