松萝酸调节RAS/ERK通路对宫颈癌细胞增殖、凋亡及免疫逃逸的影响

摘要

目的 探究松萝酸（usnic acid, UA）调节RAS/ERK通路对宫颈癌细胞增殖、凋亡及免疫逃逸的影响。方法 将HeLa细胞分为NC组（常规培养）、低（L）-UA组（40μmol/L UA）、高（H）-UA组（80μmol/L UA）、H-UA+阴性对照（pcDNA-NC）组（80μmol/L UA和1μg/mL pcDNA-NC）及H-UA+RAS过表达（pcDNA-RAS）组（80μmol/L UA和1μg/mL pcDNA-RAS）,分别应用CCK-8、免疫荧光、流式细胞仪及AO/EB双染法检测各组HeLa细胞增殖（细胞活力、Ki-67阳性率）、凋亡（细胞凋亡率、AO/EB双染凋亡细胞）及免疫逃逸（CD8⁺T凋亡率）;Western blot检测各组HeLa细胞生物学行为及RAS/ERK通路蛋白水平。结果 与NC组比较，L-UA组和H-UA组HeLa细胞活力、Ki-67阳性率、CD8⁺T凋亡率、p-Rb/Rb、p-RAS/RAS、p-RAF/RAF、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK比值及Polo样激酶1（polo-like kinase 1,PLK1）、X连锁凋亡抑制蛋白（x-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP）、存活蛋白（survivin）、程序性死亡配体1（programmed death-ligand 1,PD-L1）、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic t-lymphocyte-associated protein 4,CTLA-4）蛋白表达均下调，HeLa细胞凋亡率、AO/EB双染凋亡细胞占比、Fas配体（fas ligand, FasL）均上调，H-UA作用更显著（P<0.05）;上调RAS表达可部分逆转H-UA对HeLa增殖、凋亡及免疫逃逸的影响（P<0.05）。结论 UA通过调节RAS/ERK通路抑制HeLa细胞增殖及免疫逃逸，促进凋亡。

关键词

松萝酸 / RAS/ERK通路 / 宫颈癌 / 增殖 / 凋亡 / 免疫逃逸