基于网络药理学探讨人参总皂苷抗肺炎的药效物质基础研究

摘要

目的 通过网络药理学与实验验证相结合的策略，挖掘人参总皂苷（TG）抗肺炎的药效物质基础，明确其核心活性成分及作用机制。方法 基于TCMSP、ETCM等数据库筛选TG活性成分及靶点，通过Genecards、OMIM获取肺炎相关靶点，构建药物-疾病共靶点蛋白互作（PPI）网络；利用基因本体论/京都基因与基因组百科全书（GO/KEGG）富集分析关键通路；利用超高效液相色谱串联高分辨静电场轨道阱质谱（UHPLC-HRMS）联用技术检测TG中的成分；采用分子对接与分子动力学模拟评估活性成分与核心靶点白细胞介素-1β（IL-1β）的结合能力，通过CCK-8法、Griess试剂（检测NO释放）及流式细胞术（检测IL-1β表达）验证TG及潜在成分的抗炎活性；使用ELISA法检测活性成分对巨噬细胞PI3K、p-PI3K和AKT表达的影响。结果 共筛选出18个TG活性成分，其中9个具有明确靶点信息；PPI网络分析确定IL-1β为核心靶点（节点数>50）,KEGG富集显示其显著富集于白细胞介素-17（IL-17）等免疫通路；UHPLC-HRMS联用技术进一步验证了上述网络药理学中人参皂苷Rh2和Rb2的抗炎活性成分，分子对接表明人参皂苷Rh₂和Rb₂与IL-1β结合能最优（分别为-7.0 kcal/mol、-6.6 kcal/mol）,分子动力学模拟证实复合物稳定性良好（RMSD<0.2 nm）;细胞实验证实TG（≤50 mg/L）、Rh₂和Rb₂（≤100μmol/L）无细胞毒性，且能显著抑制脂多糖（LPS）诱导的巨噬细胞NO释放（P<0.05）、IL-1β和肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达（P<0.01）,其中Rh₂为关键抗炎成分，可抑制PI3K-AKT信号通路。结论 人参皂苷Rh₂是TG抗肺炎的核心活性成分，其机制可能通过靶向IL-1β调控免疫炎症通路实现，该结果为TG的临床应用提供了理论基础。

关键词

网络药理学 / 分子对接 / 分子动力学模拟 / 人参总皂苷 / 肺炎