丹参素通过PP2A基因调节线粒体自噬保护脑出血后神经元损伤的分子机制

摘要

目的 分析丹参素通过蛋白磷酸酶2A(PP2A)基因调节线粒体自噬保护脑出血后神经元损伤的分子机制。方法 采用氧葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤共培养的小胶质细胞和神经元，设立对照组、丹参素组、丹参素+PP2A siRNA共处理组、丹参素+阴性对照siRNA共处理组、丹参素+3-甲基腺嘌呤(3-MA)共处理组；Western blot检测小胶质细胞中PP2A及自噬相关蛋白贝克林1(Beclin 1)、自噬相关蛋白5(ATG5)和p62的表达水平；共聚焦显微镜观察自噬，流式细胞术和TUNEL染色检测神经元凋亡；检测活性氧和线粒体膜电位以评估神经元线粒体功能。结果 丹参素处理可诱导小胶质细胞中PP2A的表达(P<0.05);过表达PP2A可增加Beclin 1和ATG5蛋白水平(P<0.05),降低p62蛋白水平(P<0.05),并诱导自噬；沉默PP2A或使用自噬抑制剂3-MA可抑制自噬，减少丹参素处理的小胶质细胞中抗炎因子[白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)和脑源性神经营养因子(BDNF)]的产生(P<0.05),并诱导促炎细胞因子[IL-1β、IL-2和肿瘤坏死因子(TNF-α)]的释放(P<0.05),从而导致共培养的神经元发生线粒体功能障碍和凋亡。结论 丹参素对神经元损伤具有保护作用，PP2A基因通过调节小胶质细胞的自噬和炎症反应，在改善线粒体功能和抑制神经元凋亡中发挥作用。

关键词

丹参素 / 蛋白磷酸酶2A / 线粒体自噬 / 脑出血 / 神经元损伤