SET蛋白调控线粒体相关内质网膜系统对胃癌裸鼠移植瘤增殖与凋亡的影响

摘要

目的 探讨抑癌基因候选因子2(SET)通过调控线粒体(Mito)相关内质网(ER)膜系统(MAMs)在胃癌(GC)中的作用机制。方法 构建MKN45细胞的SET敲低与过表达模型，分为对照组(Control,空载体转染)、低表达组(L-SET,SET siRNA转染)和高表达组(H-SET,SET过表达质粒转染),将对应处理后的3组MKN45细胞分别接种于18只BALB/c(nu/nu)裸鼠(每组6只)建立皮下移植瘤模型，采用Western blot检测SET、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、肌醇1,4,5-三磷酸受体(IP3R)及电压依赖性阴离子选择性通道1(VDAC1)表达，采用苏木素-伊红染色(H&E)染色观察肿瘤组织形态，分别采用增殖细胞核抗原(Ki67)免疫组织化学法和终末转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法评估肿瘤增殖和肿瘤凋亡情况，使用透射电子显微镜(TEM)分析MAMs接触长度、线粒体占比及接触频率。结果 与Control组比较，L-SET组肿瘤组织中SET表达、肿瘤体积与质量减少，H-SET组上述指标增加(P<0.01);与Control组比较，L-SET组肿瘤组织细胞排列疏松、结构紊乱，H-SET组更致密、增殖活跃；与Control组比较，L-SET组肿瘤凋亡水平、MAMs接触长度、线粒体占比与接触频率、IP3R和VDAC1表达升高(P<0.001),但肿瘤Ki67阳性率、SET和Bcl-2表达下降(P<0.001),H-SET组上述指标呈相反趋势(P<0.001)。结论 SET可促进GC细胞的增殖与凋亡，可能与通过调控MAMs结构和功能影响Bcl-2/IP3R/VDAC1信号通路有关。

关键词

胃肿瘤 / 细胞增殖 / 细胞凋亡 / 抑癌基因候选因子2 / 线粒体相关内质网膜系统