大豆苷元对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌损伤的作用及其分子机制

摘要

目的 探讨大豆苷元（DD）对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠心肌损伤的作用及分子机制。方法 50只大鼠随机均分为假手术组（不结扎）、模型组（心肌缺血再灌注损伤大鼠模型）及DD低剂量（1.5 mg/kg）、中剂量（3.0 mg/kg）、高剂量（5.0 mg/kg）组，DD组予舌下静脉注射各剂量DD,假手术组和模型组大鼠予注射等量二甲基亚砜（DMSO）-生理盐水，1次/d、14 d,干预结束后，采用生物信息收集系统记录各组大鼠心脏血流动力学参数[左室收缩压（LVSP）、左室舒张末压（LVEDP）、左室内压上升的最大速率(+dp/dt_max)以及左室内压下降的最大速率(-dp/dt_max)];测量结束后，麻醉处死各组大鼠，取腹主动脉血和左前降支供血的变色心尖部心肌组织，采用酶联免疫吸附测定法检测血清心肌酶[乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）及肌酸激酶同工酶（CK-MB）]、肌钙蛋白Ⅰ（cTn-1）、氧化应激指标[丙二醛（MDA）含量和超氧岐化酶（SOD）]、白细胞介素6（IL-6）、IL-1β及肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量，采用4,5-二甲基-2-咪唑（TTC）染色、血红素-伊红（HE）染色法、末端脱氧核苷酸内切酶标记末端转移酶介导的dUTP末端标记（TUNEL）检测各组大鼠心肌梗死面积、心肌组织学特征及心肌细胞凋亡指数，采用蛋白质印迹检测心肌组织中核苷酸结合寡聚化域样受体蛋白3（NLRP3）、半胱天冬酶-1（caspase-1）、IL-6、IL-1β及TNF-α蛋白表达。结果 模型组大鼠相较于假手术组，表现出心功能受损（LVSP、±dp/dtmax降低，LVEDP升高）、心肌损伤指标（LDH、CK、CK-MB及cTn-Ⅰ）升高、氧化应激（MDA升高，SOD活性降低）与炎症反应（IL-6、IL-1β、TNF-α含量及蛋白表达升高）加剧，同时NLRP3/caspase-1通路激活、心肌梗死面积及细胞凋亡指数增加（P<0.05）;各剂量DD干预后，上述心功能指标、心肌损伤标志物、氧化应激、炎症因子、NLRP3/caspase-1通路相关蛋白表达、心肌梗死面积及细胞凋亡指数均得到显著改善，且SOD活性增强，这些保护作用均呈现剂量依赖性（P<0.000 1）。结论 DD对MIRI大鼠心肌组织具有保护作用，其机制可能与抑制NLRP3/caspase-1信号通路有关。

关键词

心肌缺血 / 再灌注损伤 / 氧化性应激 / 大豆苷元 / NLRP3/caspase-1信号