血管生成素4对人牙髓干细胞成牙本质向分化及碱性磷酸酶活性的影响

摘要

目的 探讨血管生成素4(Ang-4)对人牙髓干细胞(hDPSCs)成牙本质向分化及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法 分离鉴定后的hDPSCs细胞，根据不同浓度Ang-4分为空白对照组(0μg/L)、10μg/L、50μg/L及100μg/L组，通过CCK-8检测细胞增殖情况，划痕实验检测细胞迁移情况，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测成牙本质相关标志物牙本质涎磷蛋白(DSPP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、牙本质基质蛋白1(DMP-1)的mRNA和蛋白表达水平，通过ALP活性测定及茜素红染色分析细胞的分化与矿化能力。结果 与0μg/L组比较，50μg/L组细胞增殖率及迁移率均显著升高(P<0.001),DSPP、RUNX2、DMP-1的mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.01),ALP活性和矿化结节形成能力显著增强(P<0.001);上述效果均以50μg/L浓度最为显著。结论 Ang-4在体外能促进hDPSCs的迁移及成牙本质向分化，表明其可能是牙本质再生的一个潜在靶点。

关键词

血管生成素4 / 人牙髓干细胞 / 成牙本质向分化 / 碱性磷酸酶 / 矿化