桃叶珊瑚苷对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎的作用及NF-κB信号通路机制

摘要

目的 探讨桃叶珊瑚苷(AU)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎的作用及机制。方法 采用细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8)检测AU对人肠上皮细胞系HCT116细胞活力的影响，利用脂多糖(LPS)诱导HCT116细胞构建炎症模型，设置正常对照组(NC组)、LPS组(10 mg/L LPS)、LPS+AU-L组(10 mg/L LPS+AU 50 mg/L)、LPS+AU-M组(10 mg/L LPS+AU 100 mg/L)、LPS+AU-H组(10 mg/L LPS+AU 200 mg/L),通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达；将30只BALB/c小鼠随机均分为正常对照组(Control组)、DSS组(3%DSS)、AU-L组(AU 10 mg/kg)、AU-M组(AU 20 mg/kg)及AU-H组(AU 40 mg/kg),记录小鼠一般情况、计算疾病活动指数(DAI),测量结肠长度、进行组织病理学评分，采用RT-qPCR检测结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达，Western blot检测闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)、密封蛋白-2(claudin-2)及核因子κB p65亚基(P65)、磷酸化P65(p-P65)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)的表达。结果 AU在10～400 mg/L范围内对HCT116细胞无显著毒性；AU呈剂量依赖性抑制LPS诱导的HCT116细胞及DSS诱导的小鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达(P<0.05);AU干预显著降低DSS小鼠的DAI评分和组织病理学评分，增加结肠长度，改善黏膜损伤(P<0.01);DSS组p-P65、p-IκBα及claudin-2表达升高(P<0.01),ZO-1、occludin表达降低(P<0.01);AU干预后能逆转上述蛋白表达变化，且呈剂量依赖性。结论 AU可减轻DSS诱导的小鼠结肠炎及肠道屏障损伤，其机制可能与抑制核因子κB(NF-κB)信号通路活化，减少促炎细胞因子的表达，增强肠道紧密连接(TJs)蛋白表达有关。

关键词

桃叶珊瑚苷 / 葡聚糖硫酸钠 / 结肠炎 / 肠黏膜屏障 / NF-κB信号通路

基金资助

国家自然科学基金项目(82460924); 贵州省卫生健康委员会科学技术基金项目(gzwkj2025-268)