基于蛋白质组学分析艳山姜挥发油改善大鼠急性肺炎的作用机制

摘要

目的 基于蛋白质组学技术，结合体内外实验，探究艳山姜挥发油(EOFAZ)改善急性肺炎的作用与分子机制。方法 采用烟熏法联合呼吸道合胞病毒(RSV)经鼻感染法，构建SD大鼠急性肺炎模型，设空白组、模型组、EOFAZ低剂量组、EOFAZ高剂量组、阳性药地塞米松组；通过苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化，检测大鼠肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子水平；通过蛋白质组学筛选大鼠肺组织中的差异蛋白(DEPs)并进行富集分析；采用脂多糖(LPS)诱导人肺上皮细胞RLE-6TN建立炎症损伤模型炎症，通过Western blot检测关键蛋白LGALS3、PTPN2、PPP3CB的表达情况。结果 与空白组比，模型组大鼠肺组织发生炎性细胞浸润和水肿等损伤，BALF中白细胞介素(IL)包括IL-1β、IL-6、IL-2、IL-4以及肿瘤坏死因子(TNF-α)水平显著升高(P<0.05);经EOFAZ干预后，大鼠肺组织病理损伤显著改善，炎症因子水平显著降低；通过蛋白质组学共筛选出148个差异蛋白，经生物信息学分析其主要富集于炎症反应、免疫应答等生物过程，从这些生物中筛选出LGALS3、PTPN2、PPP3CB为EOFAZ的核心靶点；Western blot显示，与对照组相比，模型组大鼠的肺组织和RLE-6TN细胞中LGALS3、PTPN2、PPP3CB蛋白表达水平显著上升(P<0.05),EOFAZ给药能够显著抑制这些蛋白的上调趋势(P<0.05)。结论 EOFAZ可改善急性肺炎引起的炎症损伤，其机制可能与下调LGALS3、PTPN2、PPP3CB等蛋白表达、抑制炎症信号通路有关。

关键词

蛋白质组学 / 艳山姜挥发油 / 急性肺炎 / 炎症反应

基金资助

国家自然科学基金项目（82060772、U1812403-4-4）