miR-133a调控Shh/Ptch1通路对脊髓损伤大鼠神经元凋亡的影响

摘要

目的 探讨miR-133a调控音猬因子(Shh)/跨膜蛋白受体1(Ptch1)通路对脊髓损伤(SCI)大鼠神经元凋亡的影响。方法 重物坠落建立SCI大鼠模型，随机分为SCI组、agomiR NC组、miR-133a agomiR组、激活剂组、miR-133a agomiR+抑制剂组，以仅摘除T10椎板的10只大鼠为对照组，干预后，Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估大鼠运动功能；尼氏染色检测神经元存活情况；TUNEL/神经元核抗原抗体(NeuN)共染检测神经元凋亡变化；免疫荧光检测脊髓组织中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)离子钙结合衔接分子1(Iba1)表达；qRT-PCR检测脊髓组织中miR-133a表达；Western blot检测脊髓组织中Shh/Ptch1通路及凋亡相关蛋白(Caspase-3、Bax、Bcl-2)的表达。结果 SCI组BBB评分、尼氏小体数降低(P<0.05),miR-133a、Shh、Ptch1、Bcl-2表达较对照组降低(P<0.05),凋亡率增加(P<0.05),GFAP、Iba1阳性细胞数、Caspase-3、Bax表达增加(P<0.05);但转染miR-133a agomiR后可显著逆转上述指标变化(P<0.05);激活剂组上述指标较miR-133a agomiR组无统计意义(P>0.05);添加抑制剂阻断Shh/Ptch1通路后，联合miR-133a agomiR共同干预，可抵消转染miR-133a agomiR后的神经保护作用(P<0.05)。结论 上调miR-133a可激活Shh/Ptch1通路减轻SCI大鼠神经元凋亡。

关键词

脊髓损伤 / miR-133a / Shh/Ptch1通路 / 神经元凋亡

基金资助

贵州省高层次创新型人才基金项目(gzwjrs2024-001)