叉头框D3反义RNA 1在低级别胶质瘤细胞恶性进展中的作用及机制

摘要

目的 探讨叉头框D3反义RNA 1(FOXD3-AS1)在低级别胶质瘤(LGG)恶性转化中的调控机制。方法 公共数据库数据分析FOXD3-AS1在胶质瘤细胞中的表达差异，实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)验证其在胶质瘤细胞系中的表达水平；构建FOXD3-AS1过表达细胞，采用细胞计数试剂(CCK-8)、Transwell及划痕实验分别检测细胞活性、侵袭及迁移能力，采用免疫印迹法(Western blot)和qPCR检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白及靶向微小RNA(miRNA)的表达；结合GEPIA分析、双萤光素酶报告基因实验验证FOXD3-AS1与miR-140-5p及下游血管内皮生长因子A(VEGFA)的靶向关系；血管形成实验检测其对人脐静脉内皮细胞微血管形成，裸鼠模型评估其对肿瘤生长和血管生成的作用。结果 FOXD3-AS1在胶质瘤中的表达高于正常组(P<0.05);与对照组相比，过表达FOXD3-AS1可增强胶质瘤细胞活性、侵袭及迁移能力(P<0.05),下调miR-140-5p表达，促进EMT进程；同时上调VEGFA表达，增强微血管形成能力(P<0.01);裸鼠模型结果显示，过表达FOXD3-AS1组的肿瘤体积以及血管生成能力增强(P<0.01)。结论 过表达FOXD3-AS1可增强LGG细胞的侵袭和迁移能力，促进EMT进程和血管生成，共机制与调控miR-140-5p/VEGA激活PI3K/AKT/mTOR途径有关。

关键词

脑肿瘤 / 低级别胶质瘤 / 叉头框D3反义RNA 1 / 微小RNA-140-5p

基金资助

国家自然科学基金项目(81560105); 贵州省科学技术基金项目(黔科合基础-ZK[2021]一般365)