白念珠菌CVF1基因对Th1/Th2型炎症反应的调控作用及其分子机制

摘要

目的 探究白念珠菌诱导宿主铁死亡毒力因子1(CVF1)基因对宿主Th1/Th2型炎症反应的调控作用，并利用活体转录组测序(in vivo RNA-seq)初步解析其分子机制。方法 以白念珠菌野生株SN250(WT)及CVF1基因敲除株(cvf1)感染BALB/c小鼠48 h,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清及靶器官(肾、脾、肝)中Th1型促炎细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)与Th2型抗炎因子IL-4、IL-10水平，测定乳酸脱氢酶(LDH)含量并评估肾脏病理损伤。对感染后小鼠肾脏进行RNA-seq,筛选差异表达基因，经实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)验证后行基因本体(GO)与京都基因和基因组数据库(KEGG)富集分析。结果 cvf1敲除株感染组小鼠血清及靶器官中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10分泌水平均低于WT感染组(P<0.05),表明CVF1可上调上述4种细胞因子表达；与WT组相比，cvf1组肾、脾、肝中LDH释放水平及炎症浸润程度显著减轻，提示CVF1加剧了白念珠菌对主要靶器官的损伤；转录组共鉴定出1 401个差异表达基因(1 146个上调、255个下调),其中下调基因中检测到可激活Th1型因子(IFN-γ、IL-2)表达的Aqp4与Prlr,以及促进Th2型因子(IL-4、IL-10)表达的关键转录因子Maf编码基因；qRT-PCR验证了上述3个基因在敲除株感染组中的下调表达；基因本体论(GO)与京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集显示差异基因主要富集于Toll受体、IL-17、C型凝集素受体及细胞因子受体互作等炎症相关信号通路。结论 白念珠菌CVF1基因可诱导Th1型促炎(IFN-γ、IL-2)与Th2型抗炎(IL-4、IL-10)细胞因子表达，并加重小鼠肾、脾、肝组织损伤，其机制可能与CVF1经由Aqp4、Prlr和Maf基因分别介导对Th1/Th2型炎症的调控有关。

关键词

白念珠菌 / 白念珠菌诱导铁死亡毒力因子1 / Th1型炎症反应 / Th2型炎症反应 / 转录组测序技术

基金资助

国家自然科学基金项目(32060034、32360048); 贵州省基础研究计划重点项目(黔科合基础ZD[2026]120); 西南喀斯特区域病原微生物防治学科创新引智基地(D20009); 贵州省高层次创新型人才项目(GCC[2022]036-1); 贵州医科大学国家自然科学基金培养项目(25NSFCP03); 贵州省2025年大学生创新创业培训计划(S202510660211、JC54); 国家“111”项目(D20009); 贵州省重点实验室(ZDSYS[2023]004); 贵州省教育厅滚动支持省属高校科研平台团队项目(黔教技[2022]-019)