基于PI3K/AKT1/BAD通路探讨水疱性口炎病毒对三阴性乳腺癌凋亡的影响

摘要

目的 探究水疱性口炎病毒(VSV)对三阴性乳腺癌抗肿瘤活性机制。方法 通过GEPIA2数据库分析PI3K/AKT1/BAD信号通路相关基因在乳腺癌中的差异表达，ZDOCK对接技术分析VSV的G蛋白与PI3K、AKT1、BCL-2、BAX及Caspase-3的亲和程度；CCK-8法检测VSV对小鼠乳腺腺癌细胞(4T1)存活率的影响，TUNEL染色检测VSV干预后4T1细胞凋亡情况；以4T1细胞构建三阴性乳腺癌小鼠模型，分为对照组(PBS)、阳性药物组(盐酸阿霉素)、VSV瘤内注射组(VSV-IT)、VSV静脉注射组(VSV-IV),采用动物活体成像仪检测肿瘤体积增长，HE染色检测肿瘤、肺组织病理变化，qRT-PCR检测凋亡基因(BAX、BCL-2)的表达，免疫组化法检测肿瘤中凋亡相关蛋白BAX、BCL-2的表达水平。结果 在乳腺癌中PI3K、AKT1、BAD、BAX、Caspase-3的表达均高于癌旁组织；VSV的G蛋白与PI3K、AKT1、BCL-2、BAX、Caspase-3的最优模型的结合能从-6.69 kJ/mol到-100.83 kJ/mol; VSV干预后，4T1细胞凋亡增加；与对照组小鼠相比，VSV-IT组、VSV-IV组的小鼠肿瘤体积生长显著减缓；VSV-IT组小鼠生存期有所延长、脾指数显著降低；与对照组和VSV-IV组相比，VSV-IT组肿瘤组织中BAX的mRNA相对表达水平显著上调，BCL-2的mRNA相对表达水平显著下调，肿瘤组织中BAX蛋白表达显著上调，BCL-2蛋白表达显著下调。结论 VSV具有延缓三阴性乳腺癌肿瘤体积生长的作用，且体内瘤内注射的效果更好，这可能与其诱导肿瘤细胞凋亡有关。

关键词

水疱性口炎病毒 / 三阴性乳腺肿瘤 / 细胞凋亡 / 抗肿瘤活性

基金资助

国家自然科学基金项目(81560481)