基底外侧杏仁核谷氨酸能神经元参与异氟醚麻醉觉醒的调控

摘要

目的 探讨基底外侧杏仁核(BLA)谷氨酸能神经元在异氟醚麻醉中的调控作用。方法 采用健康雄性8～12周龄Vglut2-Cre转基因小鼠。15只小鼠随机分为光遗传激活组(ChR2组)、抑制组(GtACR组)和对照组(mCherry组),每组5只，分别在BLA核团立体定位注射兴奋性光遗传病毒rAAV2/9-EF1α-DIO-hChR2-mCherry-WPRE-hGH pA、抑制性光遗传病毒rAAV2/9-EF1α-DIO-GtACR-mCherry-WPRE-hGH pA或对照病毒rAAV2/9-EF1α-mCherry-WPRE-hGH pA,并埋置陶瓷插芯。待病毒表达3周后，对待试小鼠进行14 mL/L异氟醚麻醉，并全程记录小鼠皮层脑电(EEG),爆发抑制比(BSR)稳定时光遗传调控BLA谷氨酸神经元，比较光刺激前2 min与刺激2 min时的BSR。21只Vglut2-Gre小鼠随机分为化学遗传激活组(hM3Dq组)、抑制组(hM4Di组)和对照组(mCherry组),每组7只，分别在双侧BLA核团注射化学遗传病毒，3周后进行化学遗传调控实验，比较稳定深度麻醉状态中同一时间点各组EEG频谱及各频段百分比总功率以及翻正反射消失及恢复(LORR/RORR)时间。结果 与光刺激前相比，光刺激期间ChR2组BSR降低(P<0.05),GtACR组BSR增加(P<0.05),而mCherry组BSR无统计学差异(P>0.05)。化学遗传实验中，与mCherry组相比，深度麻醉状态下，hM4Di组皮层EEG的α、β、γ频段百分比总功率明显增加(P<0.05),hM3Dq组EEG的α、β、γ频段百分比总功率无统计学差异(P>0.05);hM3Dq组和hM4Di组LORR的时间无统计学差异(P>0.05),而hM3Dq组RORR的时间缩短，hM4Di组RORR的时间延长(P<0.01)。结论 BLA谷氨酸神经元参与调控小鼠异氟醚麻醉的觉醒过程，激活BLA谷氨酸神经元，可以显著促进小鼠从异氟醚麻醉状态中觉醒。

关键词

基底外侧杏仁核 / 谷氨酸能神经元 / 异氟醚 / 觉醒 / 遗传学技术