去铁胺通过抑制线粒体功能加重替莫唑胺诱导的胶质瘤细胞DNA损伤

摘要

目的 探讨去铁胺(DFO)加重替莫唑胺(TMZ)诱导胶质瘤细胞DNA损伤的作用及机制。方法 将U251胶质瘤细胞分为对照组、TMZ组(100μmol/L)、DFO组(500μmol/L)及两药联合处理组(100μmol/L TMZ+500μmol/L DFO)。处理24 h后，利用免疫荧光技术检测磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)焦点的形成情况；菲咯嗪-比色法和化学发光法分别检测细胞内总铁含量和线粒体铁含量；荧光法检测线粒体膜电位，ATP试剂盒和乳酸试剂盒分别测定细胞内ATP含量和乳酸含量；qRT-PCR分析铁硫簇(ISC)合成相关分子mRNA的表达，Western blotting分析DNA损伤修复相关蛋白质的表达情况。结果 DFO和TMZ会导致胶质瘤细胞产生不同程度的DNA损伤(P<0.05),且DFO可以加重TMZ诱导的胶质瘤细胞DNA损伤(P<0.01)。DFO联合TMZ显著减少细胞总铁和线粒体铁含量(P<0.05),降低线粒体膜电位及ATP含量(P<0.01),同时增加乳酸生成(P<0.01);DFO阻碍ISC合成，抑制DNA损伤修复，加重TMZ诱导的DNA损伤(P<0.05)。结论 DFO通过影响铁代谢导致线粒体功能障碍，减少ISC的合成，从而抑制DNA损伤修复，加重TMZ诱导的胶质瘤细胞DNA损伤。

关键词

去铁胺 / 替莫唑胺 / 胶质瘤 / DNA损伤 / 铁硫簇

基金资助

国家自然科学基金(82173120); 陕西省自然科学基础研究计划面上项目(2022JM-536)