M1巨噬细胞回输治疗小鼠肝癌的研究

摘要

目的 研究回输M1型骨髓来源的巨噬细胞（BMDMs）对原位肝肿瘤小鼠模型的治疗作用。方法（1）分离野生小鼠的骨髓细胞并体外诱导成BMDMs（即M0型巨噬细胞）,在IFN-γ+LPS诱导下极化为M1型巨噬细胞。通过肝内接种Luciferase-Hepa1-6细胞建立原位小鼠肝癌模型。在接种肿瘤7 d后，经尾静脉回输PBS（对照组）、M0型和M1型巨噬细胞，通过小动物活体成像技术检测小鼠肝脏肿瘤的生长状态。接种21 d后，分离并观察肝脏肿瘤大小及称取质量，确定回输不同类型巨噬细胞对小鼠肝脏肿瘤进展的影响。利用流式细胞仪分析肝脏肿瘤癌旁组织内巨噬细胞亚群变化。（2）分离GFP转基因小鼠的骨髓细胞，诱导分化成M0型和M1型巨噬细胞后经尾静脉回输至肝癌小鼠体内，利用流式细胞仪及免疫荧光等方法检测回输1、3、7 d后肝脏内GFP阳性的BMDMs细胞数。结果 与对照组相比，回输M0型和M1型BMDMs均促进了肝肿瘤的生长（P<0.05）。回输M0型或M1型BMDMs后，癌旁组织中枯否细胞增多，骨髓单核来源的炎性巨噬细胞增多（P<0.05）。经尾静脉回输1×10～6个M0型或M1型GFP⁺BMDMs, 1 d后约3×10～3个细胞驻留于肝脏中，并随着时间增长逐渐减少。结论回输M1型巨噬细胞并未能达到治疗肝肿瘤的目的，反而促进肝肿瘤的生长。

关键词

肝癌 / 巨噬细胞 / 细胞治疗 / 肿瘤相关巨噬细胞

基金资助

国家自然科学基金(82230015,31970829,82173082); 陕西省创新能力支撑计划项目(2021TD-36)