DNA改性胶原支架促进口腔黏膜缺损愈合的研究

摘要

目的 构建DNA修饰的胶原(DNA-Col)支架，探究改性后胶原(Col)生物相容性与促口腔黏膜软组织缺损愈合的性能。方法 通过将Col材料浸泡于含DNA和磷酸基团活化剂的缓冲液中进行化学交联，以此构建出DNA-Col。通过甲基绿染色对DNA-Col上交联的DNA进行表征，并进一步利用衰减全反射-傅里叶变换红外光谱对DNA与Col的交联机制进行初步探索。之后，利用扫描电镜观察DNA-Col的表面形貌。在评价DNA-Col的生物相容性方面，采用了溶血实验、CCK-8细胞增殖实验和活/死细胞染色实验。随后在体外将DNA-Col与人口腔成纤维细胞共培养，通过qRT-PCR检测转化生长因子-β(TGF-β)、成纤维细胞生长因子-1(FGF-1)的mRNA表达水平，分析DNA-Col促进口腔黏膜缺损愈合的潜力。最后，在大鼠腭部黏膜缺损模型中检测DNA-Col的促愈合能力，并于术后10 d对各组黏膜愈合情况进行组织切片分析。结果 DNA-Col保持了Col的特征性结构且生物相容性良好。人口腔成纤维细胞与DNA-Col共培养后，TGF-β、FGF-1等与细胞增殖迁移相关基因表达显著升高，提示DNA-Col具有促口腔黏膜愈合的潜力。大鼠腭部黏膜缺损模型显示DNA-Col组在术后10 d时创面愈合率可达(97.04±2.07)%,显著高于普通Col组[(79.38±5.76)%,P<0.01]。结论 DNA-Col具有良好的生物相容性以及促口腔黏膜软组织缺损愈合的性能。

关键词

胶原支架 / DNA / 口腔黏膜 / 软组织增量 / 生物相容性