混合谱系激酶域样假激酶参与小鼠高原脑水肿的初步研究

摘要

目的 探索程序性坏死关键分子混合谱系激酶域样假激酶（MLKL）在小鼠高原脑水肿（HACE）中的作用。方法 使用成年雄性C57BL/6 WT小鼠和MLKL^-/-小鼠，将小鼠分为3组，分别为对照组、WT HACE组和MLKL^-/- HACE组，每组8只。将小鼠放进小型高低压氧舱，调整海拔至5 500 m,暴露72 h,建立HACE模型。使用Western blotting检测MLKL蛋白的表达。采用脑含水量指数评估脑水肿发生的程度。采用伊文思蓝检测血脑屏障开放状态。通过免疫荧光染色检测MLKL及水通道蛋白4（AQP4）在血管的分布，免疫球蛋白IgG的渗透。应用新物体识别实验分析小鼠认知功能。结果 小鼠在5 500 m下暴露72 h可导致血脑屏障破坏，脑含水量升高（P<0.01）,新物体识别能力下降（P<0.01）,MLKL及pMLKL表达升高（P<0.05）,pMLKL与AQP4、CD31免疫荧光共标结果成点状聚集体。MLKL^-/-小鼠在同等刺激下呈现出较低程度的HACE,表现为MLKL^-/- HACE组小鼠较WT HACE组小鼠脑水含量显著减少（P<0.05）,血脑屏障开放程度降低，免疫球蛋白从血管中的渗出减少，新物体识别功能改善（P<0.05）。结论 程序性坏死关键分子MLKL参与HACE的发生与发展，敲除MLKL可减轻HACE。

关键词

高原脑水肿 / MLKL / 血脑屏障 / 程序性细胞坏死 / 细胞毒性水肿 / 小鼠