利用PiggyBac转座子技术构建NLRC5基因过表达BEAS-2B细胞系及其功能研究

摘要

目的 利用PiggyBac转座系统构建稳定表达NLRC5的BEAS-2B细胞系，为后续针对病毒抗原提呈功能的研究提供有力的工具。方法 根据NLRC5基因信息扩增目的基因蛋白编码序列，构建目的基因NLRC5的转座子质粒，将辅助质粒和转座子质粒共转染至BEAS-2B细胞。嘌呤霉素筛选稳定转导的细胞后进行单克隆化，最后对获取的单克隆细胞在分子水平上进行过表达验证。结果 成功构建一株NLRC5过表达的BEAS-2B细胞，且该细胞系可维持正常细胞活性与增殖能力。结论 通过PiggyBac转座子技术实现了NLRC5的过表达，进而提高了MHC-Ⅰ分子基因的表达。通过对该基因的过表达从而研究NLRC5对MHC-Ⅰ抗原肽提呈途径的调控机制，为理解抗病毒免疫的复杂机制以及开发新的治疗策略提供有力支持。

关键词

NLRC5 / PiggyBac转座子 / 基因过表达 / 稳定转染细胞株

基金资助

国家自然科学基金(82272330); 陕西省自然科学基金(2024JC-ZDXM-42)