BAK1 m6A甲基化修饰在乳腺癌细胞失巢凋亡中的作用和机制研究

摘要

目的 探讨BAK1的m6A修饰机制及其在乳腺癌细胞失巢凋亡中的作用，以揭示失巢凋亡抵抗的分子机制，并为乳腺癌治疗提供新的靶点。方法 采用低吸附培养法构建失巢凋亡模型，分别做低吸附处理0、24、48、72 h后收取细胞样品做后续实验。以三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和非三阴性乳腺癌细胞T47D为研究对象。通过Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率，利用Dot blot实验检测m6A水平变化，并通过Western blotting和qRT-PCR分析相关蛋白和基因的表达水平。结果 T47D在低吸附处理后凋亡率显著增加(P<0.01),而MDA-MB-231表现出较强的失巢凋亡抵抗能力。失巢凋亡引起非三阴性乳腺癌细胞中m6A水平上调(P<0.01),主要通过去甲基化酶FTO的表达介导。抑制m6A修饰可显著增强乳腺癌细胞的失巢凋亡抗性(P<0.05),且m6A修饰通过调控BAK1的表达影响细胞凋亡敏感性。结论 本研究揭示了m6A修饰在乳腺癌细胞失巢凋亡中的重要作用及其通过调控BAK1表达的机制，为理解乳腺癌细胞的侵袭和转移机制提供了新的视角，并可能为开发新的治疗策略和预后标志物提供理论依据。

关键词

乳腺癌 / 失巢凋亡 / 信使RNA / 甲基化 / 凋亡调节蛋白 / 肿瘤基因表达调控 / 肿瘤转移 / 肿瘤细胞系