人细小病毒B19通过Toll样受体促进胸腺增生相关重症肌无力的免疫机制：基于蛋白组学的整合分析

摘要

目的 基于蛋白质组学与qRT-PCR技术，初步探索人细小病毒B19(B19V)是否通过Toll样受体(TLRs)信号通路促进胸腺增生相关重症肌无力(MG)的免疫机制，为后续机制研究提供线索。方法 选取本课题组前期实验中已进行巢式PCR检测的26例石蜡包埋胸腺增生组织，包括14例伴MG和12例不伴MG样本，进行蛋白质组学检测。实验分为3组：MG伴B19V DNA阳性(MG-B19-P)组、MG伴B19V DNA阴性(MG-B19-N)组，以及非MG但B19V DNA阳性(N-MG-B19-P)组作为对照。分析MG-B19-P组分别与其余两组间的差异表达蛋白(DEPs),并通过KEGG富集分析筛选相关信号通路。进一步选取42例胸腺增生石蜡组织，按B19V DNA扩增结果及有无生发中心(GC)分为H-B19-P组、H-B19-N组、H-GC组和H-N-GC组，采用qRT-PCR检测TLRs通路相关分子的mRNA表达水平，比较组间差异。结果 蛋白质组学分析显示，MG-B19-P组与MG-B19-N组及N-MG-B19-P组均存在DEPs,且均显著富集于TLRs信号通路。qRT-PCR结果显示，H-B19-P组中TLR3 mRNA表达水平显著高于H-B19-N组(P<0.05);H-GC组中TLR9 mRNA表达水平亦显著高于H-N-GC组(P<0.01)。而TLR7在各组间表达均未见显著差异。结论 B19V可能通过调控TLR3与TLR9的表达，在不同阶段参与胸腺增生的免疫反应，从而促进MG的发生发展。本研究为阐明B19V在胸腺异常相关MG中的免疫机制提供了新思路，并提示TLR3和TLR9可能作为潜在治疗靶点。

关键词

人细小病毒B19 / 胸腺增生 / 重症肌无力 / 蛋白组学 / Toll样受体 / KEGG分析 / 生发中心 / 自身免疫性疾病

基金资助

国家自然科学基金(82472279)