TWEAK/Fn14调控大鼠脊髓损伤后胶质瘢痕形成的机制研究

摘要

目的 深入探讨TWEAK/Fn14如何调节JNK信号，进而在急性脊髓损伤(SCI)后的胶质瘢痕形成中发挥作用。方法 利用改良的Allen's打击法构建大鼠SCI模型。实验分为多个阶段：首先，设立假手术组(Sham组)和SCI组，SCI造模后1、3、7、14、28 d采用Western blotting检测脊髓组织中TWEAK/Fn14信号活化情况；接着，再次将大鼠随机分为Sham组、SCI组、anti-TWEAK组和Fc-TWEAK组，在造模后1、3、7、14、28 d使用Basso Beattie Bresnahan(BBB)评分法评估大鼠后肢运动功能。在造模后28 d,采用HE染色观察脊髓组织病理变化，TUNEL检测脊髓组织的细胞凋亡，ELISA检测脊髓组织中炎性因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平，Western blotting检测脊髓组织TWEAK、Fn14、Bcl-2、Bax、JNK、p-JNK的蛋白表达，免疫荧光染色检测脊髓组织中Iba-1、GFAP、vimentin的表达情况。结果 造模后第1、3、7、14、28日，SCI组大鼠TWEAK和Fn14蛋白表达水平显著高于Sham组(P<0.05,P<0.01)。SCI造模后1、7、14、28 d, SCI组的BBB评分较Sham组显著降低(P<0.01);与SCI组相比，anti-TWEAK组BBB评分显著增加(P<0.05),Fc-TWEAK组BBB评分显著降低(P<0.05)。与Sham组相比，SCI组部分灰质和白质神经元变性坏死，IL-6、TNF-α、IL-1β水平显著增加，细胞凋亡显著增加，Bcl-2表达显著降低，Bax、Iba-1、GFAP和vimentin表达显著增加(P<0.05,P<0.01)。给予anti-TWEAK干预抑制了脊髓组织神经元坏死和凋亡，降低IL-6、TNF-α、IL-1β、Bax、Iba-1、GFAP和vimentin水平(P<0.05),增加Bcl-2表达(P<0.05)。给予Fc-TWEAK干预，其作用效果与anti-TWEAK的相反。结论 TWEAK/Fn14表达的下调可能通过抑制JNK信号，抑制了神经炎症和小胶质细胞的活化，从而阻碍了胶质瘢痕的形成。

关键词

TWEAK/Fn14 / JNK信号 / 脊髓损伤 / 胶质瘢痕形成 / 神经炎症 / 凋亡