Cx43在模拟失重致血管平滑肌细胞表型转换中的作用

摘要

目的 探究缝隙连接蛋白43(Cx43)在模拟失重致血管平滑肌细胞表型转换中的作用。方法 采用细胞应力加载培养系统模拟失重效应，将培养的人动脉平滑肌细胞(HASMCs)随机分为正常重力组(NC组)与模拟失重组(SMG组)。持续循环拉伸96 h后，质谱筛选差异蛋白；通过Western blotting测定HASMCs中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌蛋白22-α(SM22α)、骨桥蛋白(OPN)及Cx43的表达情况，结合Transwell迁移实验评估其迁移能力；利用shRNA慢病毒载体构建Cx43敲低细胞并循环拉伸96 h后验证其功能。结果 蛋白组学结果显示，与NC组相比，SMG组收缩表型相关蛋白ACTA2、TAGLN出现显著性下调，迁移相关蛋白LPAR1、TGFBR1、PDGFD、GJA1出现显著性上升，且在细胞迁移正调控和细胞因子相互作用等方面显著富集。进一步实验结果显示，与NC组相比，SMG组HASMCs中α-SMA和SM22α水平明显下降(P<0.05),OPN表达显著升高(P<0.05),且迁移细胞数量显著增加(P<0.05)。SMG组HASMCs中Cx43的mRNA和蛋白水平相较于NC组明显升高(P<0.05)。敲低Cx43使SMG组的α-SMA、SM22α蛋白表达显著上升(P<0.05),OPN蛋白表达显著下降(P<0.05);Transwell实验结果表明，敲低Cx43可抑制HASMCs迁移能力。结论 模拟失重效应通过Cx43通路促进平滑肌细胞的表型转换，并促进其迁移能力。

关键词

模拟失重 / Cx43 / 血管平滑肌细胞 / 蛋白组学 / 表型转换 / 迁移能力 / 机械应力 / 转染

基金资助

国家自然科学基金面上项目(3207090219)