丹参酮ⅡA与灯盏乙素协同抑制PKCδ/NLRC4/Caspase-1通路改善缺血性脑卒中的机制

摘要

目的 探究丹参酮ⅡA（TanⅡA）与灯盏乙素（Scu）对缺血性脑卒中的协同神经保护作用及潜在分子机制。方法 体外培养原代神经元，建立谷氨酸（Glu）诱导的兴奋性毒性损伤模型，初步筛选具有神经保护作用的中药单体，并利用H₂O₂诱导的氧化应激损伤模型进行验证。构建光化学血栓卒中（PTS）小鼠模型，探究TanⅡA和Scu的协同体内保护作用。采用神经功能缺损评分、TTC染色、HE染色和尼氏染色评估神经功能与组织损伤，利用RNA测序、Western blotting、ELISA及qRT-PCR技术探索分子机制。结果 体外实验中，TanⅡA或Scu均能显著改善Glu或H₂O₂引起的神经元损伤。体内实验中，TanⅡA与Scu联合给药可显著降低PTS模型小鼠的神经功能缺损评分、缩小梗死体积并减轻神经元损伤，且效果优于任一单药。RNA测序分析显示，联合给药能显著下调Prkcd基因表达;分子生物学检测证实，联合治疗可协同抑制PKCδ/NLRC4/Caspase-1信号通路，降低IL-1β、IL-18等促炎因子水平，减轻神经炎症反应。结论 TanⅡA和Scu通过抑制PKCδ/NLRC4/Caspase-1信号通路介导的神经炎症，发挥协同神经保护作用，为缺血性脑卒中的治疗提供了新策略。

关键词

缺血性卒中 / 丹参酮ⅡA / 黄酮类 / 神经保护 / 神经炎性疾病 / 蛋白激酶Cδ / 半胱天冬酶1 / 疾病模型,动物