miR-423-5p通过靶向XIAP促进肺癌细胞凋亡

摘要

目的 探究miR-423-5p对肺癌细胞凋亡的作用及机制。方法 利用TCGA数据库分析miR-423-5p在肿瘤组织与正常组织中的表达差异及其与肺癌预后的关系。在肺癌细胞系A549、PC-9细胞中，分别转染miR-NC、miR-423-5p和miR-423-5p抑制剂，分为miR-NC组、miR-423-5p组和miR-423-5p抑制剂组。利用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-423-5p的靶基因。采用qRT-PCR检测各组中miR-423-5p和靶基因mRNA的相对表达水平；采用Western blotting技术检测各组中靶基因的蛋白表达量。结果 miR-423-5p在肺癌肿瘤组织中的表达量显著低于正常组织(P<0.05),miR-423-5p高表达与患者预后呈正相关(P<0.05)。相较于对照组(miR-NC组),过表达miR-423-5p(miR-423-5p组)导致肺癌细胞凋亡显著增加(P<0.05),抑制miR-423-5p(miR-423-5p抑制剂组)导致肺癌细胞凋亡显著减少(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示，与对照组相比，过表达miR-423-5p显著抑制X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)3′非翻译区质粒的荧光素酶活性(P<0.01)。与对照组相比，miR-423-5p组中XIAP的mRNA水平和蛋白水平均显著降低(P<0.01),miR-423-5p抑制剂组中其表达水平显著升高(P<0.01)。结论 miR-423-5p可通过靶向XIAP促进肺癌细胞的凋亡，从而抑制肺癌进展。

关键词

microRNAs / 肺肿瘤 / 细胞凋亡 / X连锁凋亡抑制蛋白 / 基因表达调控 / 预后 / 流式细胞术 / 荧光素酶