神经干细胞通过旁分泌途径促进血管生成加速糖尿病创面愈合

摘要

目的 探讨神经干细胞(NSCs)对糖尿病创面愈合的促进作用，并阐明其调控血管再生的相关机制。方法 无菌分离胚胎14.5 d C57BL/6小鼠来源的NSCs,采用免疫荧光染色法鉴定其干性特征。通过CCK-8法、Transwell小室实验及基质胶成管实验，评估NSCs条件培养基(NSCs-CM)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移及成管能力的影响。建立高脂饮食联合链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠全层皮肤缺损模型，将模型小鼠随机分为对照组与NSCs处理组，分别于创缘局部注射PBS或NSCs悬液。动态观察创面愈合率，并采用HE染色与CD31免疫组化染色评估组织修复及新生血管形成情况；通过qRT-PCR检测创面组织中血管再生相关因子mRNA的表达水平。结果 成功分离并培养获得高表达SOX2和Nestin的NSCs。体外实验结果表明，NSCs-CM可显著促进HUVECs的增殖、迁移及成管能力。体内实验结果显示，与对照组相比，NSCs局部移植可显著提高糖尿病小鼠创面愈合率，增加再生表皮厚度及创面新生血管密度，同时显著上调创面组织中血管内皮生长因子-A、血管内皮生长因子受体2、血管生成素-1及血管生成素-2的mRNA表达水平(P<0.01)。结论 NSCs能够上调促血管生成因子的表达，通过旁分泌机制增强血管内皮细胞功能活性，促进创面新生血管形成，从而加速糖尿病创面愈合。本研究为NSCs在糖尿病创面治疗中的应用提供了新的实验依据。

关键词

神经干细胞 / 糖尿病 / 旁分泌 / 伤口愈合 / 血管生成 / 血管内皮细胞 / 细胞增殖 / 细胞迁移