弗氏弧菌C1中褐藻胶裂解酶的异源表达及酶学性质研究

摘要

本研究从腐烂的海带中筛选到一株可降解褐藻胶的菌株，并进行了菌种鉴定、褐藻胶裂解酶基因的异源表达及酶学性质研究。该菌株鉴定为弗氏弧菌（Vibrio furnissii）C1,将其基因组中注释的褐藻胶裂解酶基因alg792和alg796在大肠杆菌中异源表达，得到重组褐藻胶裂解酶Alg792与Alg796,比活力分别为950与116 U/mg; Alg792和Alg796的最适反应温度分别是40、25℃,Alg792在30℃的酶活力稳定性更好，当温度超过40℃时，两种酶在30 min内酶活力损失超过80%;Alg792与Alg796的最适pH均为7.0,Alg796的pH适用范围更宽，Alg792的pH稳定性更好；Cu²⁺、Zn²⁺和EDTA对两种重组酶活性完全抑制，Mg²⁺、Na⁺可激活两种酶的活性，而Ca²⁺、Mn²⁺、K⁺对两种重组酶的作用相反；两种重组酶均为双功能酶，Alg792为内切酶，Alg796为外切酶。这两种褐藻胶裂解酶在褐藻胶的高附加值产品开发中具有良好应用潜力。

关键词

褐藻胶裂解酶 / 弗氏弧菌 / 异源表达 / 酶学性质 / 蛋白分离纯化