脂多糖刺激人乳腺上皮细胞SYK及炎症因子的表达变化

摘要

目的：探讨脂多糖(LPS)刺激人乳腺上皮细胞中脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase, SYK)表达变化及对炎症因子分泌的影响。方法：不同浓度LPS诱导人乳腺上皮细胞产生炎症反应，制备急性乳腺炎细胞模型；通过CCK-8法检测细胞增殖活性；采用实时荧光定量PCR技术确定LPS最适刺激时间、浓度及该条件下SYK、炎症因子mRNA表达水平；免疫荧光法检测LPS刺激人乳腺上皮细胞后SYK蛋白表达的变化。结果：CCK-8结果显示，25μg/mL LPS刺激1 h,人乳腺上皮细胞增殖活性无明显变化(P>0.05);实时荧光定量PCR结果显示，25μg/mL LPS刺激1 h后乳腺上皮细胞SYK基因表达最显著(P<0.05);LPS刺激后，白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α和NLRP3表均增高(P<0.05),siRNA敲低SYK基因后，IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α和NLRP3表达均降低(P<0.05)。结论：抑制SYK基因可减少LPS诱导的乳腺炎细胞模型炎症因子释放，对于乳腺上皮细胞具有一定保护作用。

关键词

乳腺炎 / 脾酪氨酸激酶 / 脂多糖 / 炎症因子