氧糖剥夺再灌注对神经元Wnt5a/FZD2/Ca²⁺通路的影响

摘要

目的：探讨氧糖剥夺再灌注（OGD/Rep）后神经元细胞内Wnt5a/FZD2/Ca²⁺通路的变化。方法：采用OGD/Rep模型构建神经元细胞局部缺血/再灌注损伤，分正常组、再灌注（0、3、6、9、12、24 h）组。免疫荧光鉴定皮层神经元细胞，CCK-8法确定神经元细胞OGD时间，Western blotting检测非经典Wnt/Ca²⁺信号通路中Wnt5a、FZD2、IP3-R和p-CaMKⅡ/CaMKⅡ蛋白的变化，免疫荧光和酶标仪检测细胞内Ca²⁺和活性氧（ROS）的含量。结果：MAP-2免疫荧光鉴定原代皮层神经元细胞纯度较高。与正常组比较，神经元细胞OGD 3 h后细胞存活率为55.46%;与正常组比较，OGD/Rep后非经典Wnt/Ca²⁺信号通路相关蛋白Wnt5a（3、6、9、12、24 h）、FZD2（3、6、9 h）、IP3-R（6、9、12、24 h）和p-CaMKⅡ/CaMKⅡ（6 h）的相对表达量上调（P<0.05～P<0.01）;与正常组比较，OGD/Rep后神经细胞内Ca²⁺和ROS的表达量均升高（P<0.01）。结论：神经元细胞OGD/Rep能激活Wnt5a/FZD2/Ca²⁺信号通路。

关键词

脑卒中 / 神经元 / 氧糖剥夺/复氧 / Wnt/Ca²⁺信号通路