miR-301诱导胃癌细胞对顺铂的耐药性及其相关机制研究

摘要

目的：探讨miR-301对胃癌顺铂耐药的影响及其诱导胃癌细胞顺铂耐药的机制。方法：通过浓度梯度倍增法建立顺铂耐药的胃癌细胞系，并通过划痕实验和transwell实验检测亲本株与耐药株的迁移和侵袭能力；实时荧光定量法检测耐药细胞系和其亲本细胞系中miR-301的表达，同时检测耐药细胞株转染miR-301抑制剂后miR-301表达的变化；CCK-8法检测转染后细胞对顺铂的敏感性的改变；再次用细胞功能试验检测转染前后细胞迁移和侵袭能力；流式细胞术检测转染前后细胞抗凋亡能力；Western blotting检测转染后上皮间质转变标志物的变化。结果：胃癌细胞耐药株迁移和侵袭能力显著高于其亲本株(P<0.01),同时miR-301的表达高于其亲本株(P<0.01);耐药细胞转染miR-301抑制剂后，miR-301表达下降(P<0.01),与空白对照组相比，抑制剂组顺铂半数致死量浓度降低(P<0.01),细胞迁移和细胞侵袭能力下降(P<0.01),细胞凋亡增加(P<0.01),上皮细胞标志E-Cadherin表达增加，间质细胞标志N-Cadherin、Vimentin表达减少。结论：miR-301诱导胃癌细胞迁移、侵袭能力提高，提高抗凋亡能力，促进上皮间质转变，从而增强胃癌细胞对顺铂的耐药性。

关键词

胃肿瘤 / microR-301 / 顺铂 / 耐药 / 上皮间质转变