miR-381-3p靶向调控Sox9对高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响

doi:10.13898/j.cnki.issn.2097-5252.2025.02.003

蚌埠医科大学学报 ›› 2025, Vol. 50 ›› Issue (02) : 152 -158. DOI: 10.13898/j.cnki.issn.2097-5252.2025.02.003

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摘要

目的：探讨微小RNA-381-3p(miR-381-3p)靶向性别决定区Y框蛋白9(Sox9)对高糖(HG)诱导肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡的影响。方法：体外培养肾小管上皮细胞系HK-2细胞，将HK-2细胞分为对照组、HG组、HG+miR-NC组(转染miR-NC)、HG+miR-381-3p mimics组(转染miR-381-3p mimics)、HG+si-NC组(转染si-NC)、HG+si-Sox9组(转染si-Sox9)、HG+miR-381-3p mimics+pcDNA组(miR-381-3p mimics与pcDNA共转染)和HG+miR-381-3p mimics+pcDNA-Sox9组(miR-381-3p mimics与pcDNA-Sox9共转染),除对照组外，其余组均用30 mmol/L葡萄糖处理。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测HK-2细胞miR-381-3p及Sox9 mRNA表达；流式细胞仪检测细胞凋亡情况；免疫印迹法检测各组HK-2细胞Sox9、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验验证miR-381-3p与Sox9的靶向关系。结果：与对照组比较，HG组细胞凋亡率、Bax mRNA及蛋白表达水平升高，miR-381-3p、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。经targetscan数据库预测显示，miR-381-3p与Sox9 mRNA 3′UTR区有结合位点。过表达miR-381-3p或抑制Sox9表达，细胞凋亡率、Bax、Sox9 mRNA及蛋白表达水平降低，Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平升高，差异均有统计学意义(P<0.05);过表达Sox9可逆转过表达miR-381-3p对HG诱导的HK-2细胞凋亡的抑制作用(P<0.05)。结论：miR-381-3p在HG诱导的肾小管上皮细胞中低表达，过表达miR-381-3p可通过靶向抑制Sox9表达，从而减少了HG诱导的肾小管上皮细胞凋亡。